Q&A-索码生物

Q:

周末不想来实验室换液，应该如何操作（周末double feed）？

A:

首先在周五时需要确保细胞密度低于30%，才可进行此操作，否则周末时细胞可能因为缺少营养而死亡。一个常见的做法是在周四时对细胞进行复苏或传代，并通过以往对该细胞系生长速度的了解，通过接种特定的细胞数将其长满的时间控制在下周一/二；如果缺少该信息，也可以简单地接种2-3个梯度。在周五换液时，以六孔板/孔加入4ml培养基的量换液，即可省去周末换液的麻烦。

Q:

R2-01-01培养基推荐使用量为多少？

A:

以六孔板一孔（约10cm2）为例，推荐用量范围为2-4 mL。有研究表明，液面高度直接关系到培养箱中的空气和二氧化碳对容器底部的细胞的‘浸润’程度，过低或过高的液面都对细胞生长不利。日常用量为2mL/孔，换液时若观察到细胞汇合度处于50-75%之间，可额外加入1-2 mL培液。

Q:

索码iPSC维持培养基（R2-01-01）允许隔天换液吗？

A:

是的，使用R2-01-01培养基是可以进行隔天换液的，这是因为其配方中使用了热稳定型（37℃下可稳定存在数天）而非野生型bFGF（37℃下半衰期仅为8-10小时）。当细胞汇合度达50%以上，建议每天更换新鲜培养基。

Q:

索码iPSC细胞产品的特点与优势？

A:

1）提供伦理批号，可溯源; 2）提供国际干细胞注册编号，发文章直接引用 3）代次低且提供最新鉴定报告 4）细胞来源种类多，二十多种细胞可选 5）经多种细胞和类器官分化验证 6）一对一技术指导，协助客户养好细胞， 7）专注iPSC十余年，提供iPSC一站式解决方案

Q:

iPSC-疾病模型杂合和纯合如何选择？

A:

iPSC-疾病模型的杂合和纯合的选择主要取决于疾病的遗传模式，常染色体显性遗传的疾病优先选择杂合子模型，常染色体隐形遗传的疾病则首选纯合子模型，杂合子可作为携带无症状的对照组。在此基础上，结合研究的具体问题和对照设计来最终确定，如果科研问题涉及到剂量效应，构建包括野生型、杂合、纯合的等位基因系列是最理想的。

Q:

iPSC建系方法以及完成周期？

A:

可以对多种来源体细胞样本建系，如血液分离PBMC、羊水细胞、皮肤成纤维细胞等，通过仙台病毒或者游离型质粒电转法将重编程因子（Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc）转染到细胞，无异源性物质体系诱导培养，挑出克隆并进行扩增。建系后的细胞会进行8项鉴定服务和2项质检服务，建系成功率大于99%，建系及鉴定完成周期短至4个月。