A:
首先观察细胞汇合度至80%左右,且细胞状态良好可进行传代。一般情况下3-6天传代一次,即使克隆团较小、汇合度不足,也不建议连续培养7天以上。或者细胞汇合度较低,但干细胞集落过大,中央细胞生长不良也要进行传代。传代比例可根据细胞生长状态和实验需要按1:5-1:10进行传代。消化时在显微镜下观察细胞克隆出现裂缝时说明消化完全,应终止消化。若传代接种后的细胞多为单细胞而非小的细胞团块或细胞活率低,建议前24h内加入Y27632帮助细胞贴壁和存活,18-24h后更换不含y的新培养基,此后每天换液。