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即用型玻连蛋白铺底液
货号:
R2-02-05
规格:
100 mL
储存条件:
-20℃,12个月;2~8℃,2至4周
产品介绍:
本产品主要功能成分为重组表达的人玻连蛋白(VTN),采用 HEK293 细胞表达体系,由 GMP 级工艺制备,专用于人多能干细胞(hESC与hiPSC)的体外无饲养层贴壁培养。与基质胶相比,VTN的保存不要求严格温控,且由于其主要依靠与整合素(Integrins)的的结合来促进细胞粘附(基质胶则是由多种蛋白构成的凝胶网络,机制复杂,批次间存在差异),使用索码 UniZyme或 Gentlease能稳定地在减小对细胞损伤的前提下尽可能多地将在VTN 上生长的细胞消化下来。与索码 R2-01-01培养基配合使用时,可高效维持人多能干细胞的正常增殖活性及多向分化潜力。 本产品为配制完成的玻连蛋白即用型工作液,化冻后即可使用,在多能干细胞培养中最容易出问题的包被环节为使用者提供稳定、均一、可靠的培养基质。
操作流程和注意事项

1. 解冻:从-20℃冰箱取出包被液,在2~8℃冰箱过夜化冻。初次化冻后可将本产品分装为短期使用的小份(如10-20 mL /份),于-20℃长期保存;使用后请尽快将本产品放回2~8℃冰箱,避免长时间暴露于室温条件,或反复冻融。

2. 包被:将完全化冻的包被液加入经TC处理的无菌培养容器中,推荐使用量为0.1 mL /cm2(即六孔板一孔使用1 mL),晃动容器使包被液完全覆盖容器底面。

3. 孵育:将加液后的培养容器在37℃培养箱中孵育至少一小时。

4. 保存:包被好的培养容器若不立即使用,可在37℃培养箱中放置3-5天,或用无菌封口膜密封后,在2~8℃冰箱冷藏保存2周,使用前需复温至室温。

5. 使用:吸弃容器内的包被液,立即加入预热好的培养基或细胞悬液,进行后续实验。

注意事项
经 TC 处理的无菌培养容器不能通过紫外线照射杀菌。紫外线会通过光化学反应切断TC涂层的上的亲水性化学键,使玻连蛋白分子附着率减弱,进而导致细胞贴壁减弱或完全无法贴附。已被紫外线照射破坏了涂层的 TC 容器不能通过增加 VIN 使用浓度来弥补这种缺陷。
本产品仅用于科研实验,不可用于临床诊断、治疗及食品、化妆品等领域。