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玻连蛋白(rh-Vitronectin)
货号:
R2-02-04
规格:
1mL
储存条件:
-20~-80℃,36个月;2~8℃,7至10天
产品介绍:
本产品为重组表达的人玻连蛋白(rh-Vitronectin ,以下简称VTN),采用 HEK293 细胞表达体系,由 GMP 级工艺制备,专用于人多能干细胞(hESC与hiPSC)的体外无饲养层贴壁培养。
产品优势

与基质胶相比,VTN的保存不要求严格温控,且由于其主要依靠与整合素(Integrins)的的结合来促进细胞粘附(基质胶则是由多种蛋白构成的凝胶网络,机制复杂,批次间存在差异),使用索码 UniZyme或 Gentlease能稳定地在减小对细胞损伤的前提下尽可能多地将在 VTN 上生长的细胞消化下来。与索码iPSC维持培养基(货号:R2-01-01)配合使用时,可高效维持人多能干细胞的增殖活性及多向分化潜能。

操作流程和注意事项

1.解冻:从-80~-20℃冰箱取出VTN,在2~8℃冰箱缓慢化冻,或在室温化冻后立即放回2~8℃冰箱。初次化冻后可将本产品分装为单次使用的小份(50-200μL/份),于-80~-20℃长期保存;使用后请尽快将本产品放回2~8℃冰箱,避免长时间暴露于室温条件,避免反复冻融。

2.工作液制备:用不含Ca2+、Mg2+离子的DPBS将VTN以1:100的比例稀释,吹打混匀。

3.包被:将制备完成的工作液加入经TC处理的无菌培养容器中,推荐使用量为0.1 mL/cm2(即六孔板一孔使用1mL),晃动容器使工作液完全覆盖容器底面。

4.孵育:将加液后的培养容器在37℃培养箱中孵育至少一小时。

5.保存:包被好的培养容器若不立即使用,可在37℃培养箱中放置3-5天,或用无菌封口膜密封后,在2~8℃冰箱冷藏保存2周,使用前需复温至室温。

6.使用:吸弃容器内的VTN工作液,立即加入预热好的培养基或细胞悬液,进行后续实验。

注意事项
经 TC 处理的无菌培养容器不能通过紫外线照射杀菌。紫外线会通过光化学反应切断TC涂层上的亲水性化学键,使玻连蛋白分子附着率减弱,进而导致细胞贴壁减弱或完全无法贴附。已被紫外线照射破坏了涂层的 TC 容器不能通过增加 VTN 使用浓度来弥补这缺陷。
本产品仅用于科研实验,不可用于临床诊断、治疗及食品、化妆品等领域。
产品信息

名称

玻连蛋白(rh-Vitronectin)

表达细胞系

HEK293

蛋白序列

人玻连蛋白截短型(aa:Asp20-Leu478),C端融合6-His 标签

预测分子量

53.1kDa